蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリッド法を用いるゲノムの解析

　 奥村克純

目標

　蛍光 in situ ハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）法は、種々のＤＮＡクローンのそ れぞれのゲノム上での位置を、蛍光顕微鏡下に容易に決定できる方法です。この研究では、このＦＩＳＨ法に画像解析を利用し、データの解析を容易にしたり、スピートアップを図ること等を目標にしています。特に、ＦＩＳＨデータの画像化については、日本における先導的立場になるので、高感度カメラ画像解析システムの利用、紹介、普及といった点も大きな目標の一つです。さらに、このシステムを改善していくことに加えて、

• 多色カラーＦＩＳＨの導入、改良
• ＹＡＣクローンに対するＦＩＳＨ　
• 種々のＤＮＡクローンのマッピング、及び、整列化
• 高精度マッピング法の開発
• 他の基礎研究への応用

　このような技術は、単にヒトゲノム解析計画だけでなく、他の生物種に活用したり、また、分子細胞工学のような新しい研究分野の基盤技術としても重要であり、関連研究者への技術紹介も目的の一つとしています。

成果

　 　ＦＩＳＨ法の普及を目指したトレーニングコースを行う一方、高感度冷却ＣＣＤカメラ画像解析システムを導入し、この利用法や紹介を行ってきました。その結果、日本を代表するいくつかの研究室に、紹介したシステムが導入され、その数も増えつつあります。さらに、外国を含むいくつかのグループと協力して、問題点を改善していく予定です。このシステムでは、蛍光顕微鏡の新しい種々のフィルターと組み合わせ、多数のカラーで、同時に種々の遺伝子が存在する場所を示すことができます。

さらに、

• 新しい蛍光物質を用いて、多色カラーＦＩＳＨを行う
• 染色体標品の作製法を検討し、より精度の高い遺伝子のマッピング法を開発する
• 画像解析システムを、より使いやすいものとする
• ＤＮＡ複製系の解析や、核内におけるＤＮＡの動態を解析する

奥村克純：ＦＩＳＨによる核内ＤＮＡの解析・(1992)蛋白質核酸酵素, 37,1546-155